Сколько времени занимает бактериологический анализ спинномозговой жидкости

Бактериологический анализ спинномозговой жидкости обычно занимает от 2 до 7 дней, в зависимости от лаборатории и используемых методов. Время анализа включает в себя как саму обработку образца, так и время на получение результатов подтверждающего тестирования.

Важно учитывать, что в экстренных случаях результаты могут быть получены быстрее, что позволяет врачам оперативно принять решение о лечении. Однако стандартные сроки остаются актуальными для большинства плановых исследований.

Ликвор. Микробиологическое исследование

Микробиологическое исследование спинномозговой жидкости осуществляется в случаях, подобных менингиту, а также при наличии коматозных состояний и неясных неврологических проявлений.

Спинномозговая жидкость является стерильной, поэтому положительный результат тестирования всегда означает наличие диагноза. Причины менингитов различны. Чаще всего выделяются следующие микроорганизмы:

1) при гнойных менингитах: менингококк, пневмококк, золотистый стафилококк, стрептококки групп A, B, D, Н, а также бактерии Escherichia coli, протеус, псевдомонос и другие;

2) при асептических менингитах: туберкулезная палочка, возбудитель лептоспироза, токсоплазмоза, вирусы.

Необходимо проводить пробу в асептических условиях. Материал собирают в двух стерильных пробирках: одна идет на цитологическое исследование, другая — на бактериологическое. Поскольку некоторые патогены чувствительны к охлаждению, материал следует как можно быстрее доставить в лабораторию, поддерживая температуру 37 °C.

Транспортируемую пробу центрифугируют. Надосадочную жидкость отбирают стерильной пипеткой и используют для биохимических и серологических исследований. Оставшийся осадок и примерно 0,5 мл жидкости необходимы для приготовления мазков для посева. Из осадка готовят два тонких мазка на стекле, которые окрашиваются по Граму метиленовым синим и сразу же микроскопируются. В некоторых случаях можно выявить возбудителей, таких как менингококк или пневмококк, по их типичной морфологии.

Результаты первичной микроскопии служат основанием предварительной диагностики. Для посева берут жидкость в стеклянной пробирке.

Посевы спинномозговой жидкости проводятся на следующих питательных средах:

1) «двойная среда»;

2) «среда для контроля стерильности»;

3) жидкую среду Сабуро;

3) Среда Рапопорт.

К осадку, оставшемуся в пробирке, добавляют 5 мл сывороточного полужидкого кляра — среду обогащения.

Наблюдение за ростом осуществляется после ночной инкубации, а затем ежедневно на протяжении 7 дней до появления каких-либо признаков роста.

При отсутствии роста дается отрицательный результат на 9-10-й день.

Выделение микроорганизмов из спинномозговой жидкости является показателем их этиологической роли. Необходимо проводить количественный анализ бактериального роста.

В случае положительного результата проводят дальнейшую идентификацию с определением их свойств, типизируя их, определяя чувствительность к антибактериальным препаратам.

Бактериология: посев спинномозговой жидкости

Спинномозговая жидкость или ликвор — это жидкость, которая непосредственно контактирует с центральной нервной системой, то есть головным и спинным мозгом.Ликвор вырабатывается в сосудистых сплетениях желудочков головного мозга и обеспечивает постоянство внутренней среды, путем транспорта биологически активных веществ, выведении продуктов метаболизма нервных клеток, регулирует внутричерепное давление и защищает от механических воздействий. У здорового человека ликвор стерилен, он может содержать глюкозу, белок и некоторые химические элементы.

Присутствие микрофлоры в ликворе — это фактор, указывающий на крайне тяжелые заболевания, требующие незамедлительного вмешательства для предотвращения серьезных неврологических осложнений, таких как парезы и параличи.

Несвоевременное лечение может привести к летальному исходу, что требует от врачей быстрой тактики подбора правильного медикаментозного лечения пациента. Для наиболее быстрого лечения больного необходимо использовать только те антибиотики, к которым чувствительны болезнетворные бактерии, именно с этой целью используется посев спинномозговой жидкости.

Забор ликвора осуществляется в хирургическом кабинете. Пациенту рекомендуется лечь на бок с согнутыми к животу ногами. Кожную поверхность обрабатывают дезинфицирующим раствором, после чего проводят инфильтрационную анестезию для предотвращения болевых ощущений.

После чего иглой Бира с мандреном делают прокол между остистыми отростками 3 и 4 поясничных позвонков, которые находят путем проведения условной линии между крыльями подвздошных костей. Иглу вводят вглубь приблизительно на 5-7 см до проникновения в позвоночный канал, откуда и производят забор ликвора. Первые несколько капель ликвора сливают, т.к. он содержит эритроциты из сосудов мягких тканей. Затем ликвор набирают в стерильную емкость.

По завершении процедуры пациент должен оставаться в горизонтальном положении не менее двух часов. Ликвор затем направляется в лабораторию, где готовятся пробирки для исследования используемых антибиотиков.

Врач-лаборант проводит инокуляцию путем разведения стандартной микробной взвеси на питательной среде, полученный раствор вводят в каждую пробирку, после чего в каждую пробирку добавляется исследуемый антибиотик. Пробирки помещают в термостат на сутки.

Методика проведения анализа

Для получения спинномозговой жидкости выполняется пункция субарахноидального пространства. Ткани нервной системы не должны быть повреждены. Прокол делают ниже второго поясничного позвонка под местной анестезией. Для анализа достаточно 2-3 мл жидкости. Полученный пунктат центрифугируют, осадок помещают на предметное стекло и сушат в термостате.

Затем мазки окрашивают различными способами и изучают под микроскопом.

Процедура проходит практически безболезненно, неприятные ощущения могут возникнуть только на этапе введения иглы. Осложнения после пункции встречаются крайне редко и, как правило, связаны с неправильным выполнением процедуры.

Важность исследования

Патологические процессы могут возникать в любом отделе организма, в том числе и в нервной системе. Возможны случаи формирования кровотечений, инфекций, новообразований и других дефектов. Для проведения дифференциальной диагностики и определения точного повреждающего фактора требуется исследование клеточного состава спинномозговой жидкости. Для этой цели выполняется цитологическое исследование, что позволяет быстро достичь следующих целей:

• установление точного диагноза;
• выявление первичного повреждающего фактора;
• подбор адекватных методов лечения;
• мониторинг динамики развития патологии;
• оценка результатов завершенного лечения.

При отсутствии проведения цитологического исследования может быть установлен неверный диагноз или вовсе не определена причина поражения. При отсутствии адекватных методов терапии быстро разовьются следующие осложнения:

• обильные кровотечения, которые могут давить на здоровые ткани головного или спинного мозга, вызывая параличи, угнетение дыхательной функции и возможный летальный исход;
• развитие менингита и энцефалита под воздействием инфекции;
• снижение когнитивных и других функций организма вследствие демиелинизирующего процесса;
• развитие доброкачественной опухоли, способной сжимать соседние ткани и подвергаться злокачественному перерождению;
• распространение атипичных клеток злокачественной опухоли с образованием метастазов в других органах.

Назначить анализ может любой лечащий врач, подозревающий поражение центральной нервной системы. Процедура должна проводиться только при появлении негативных клинических симптомов. Спинномозговая пункция может вызывать осложнения при неправильном выполнении, поэтому не рекомендуется для профилактических целей. Тем не менее, именно с помощью этого анализа можно с большой точностью установить диагноз и быстро подобрать соответствующее лечение.

Техника проведения спинномозговой пункции

Для осуществления пункции спинномозговой жидкости обследуемого укладывают на жесткий стол на правом боку, нижние конечности подняты к брюшной стенке и обхвачены руками. Возможно выполнение прокола в сидячем положении, но при этом спина также должна быть как можно больше согнута. У взрослых допускаются проколы ниже второго поясничного позвонка, у детей ввиду риска повреждения спинномозговой ткани — не выше третьего.

Техника выполнения спинномозговой пункции не представляет собой сложности для квалифицированного специалиста, а строгая соблюдаемость протокола позволяет избежать серьезных осложнений. Пункция спинномозговой жидкости включает несколько последовательных этапов:

• Подготовительный этап — стерильная игла с мандреном, контейнеры для сбора ликвора, один из которых стерильный, подготавливает медсестра перед самой процедурой; врачу предоставляются стерильные перчатки, дополнительно протертые спиртом;
• Пациент располагается на правом боку, согнув ноги в коленях, помощник дополнительно сгибает позвоночник больного и фиксирует его в указанном положении;
• Медсестра обрабатывает место введения иглы в поясничной области, начиная с точки прокола и двигаясь к периферии, дважды йодом, затем трижды этанолом для удаления остатков йода;
• Хирург определяет место пункции, ощущения подвздошного гребня, мысленно проводит перпендикулярную линию от него к позвоночнику, которая проходит между третьим и четвертым поясничными позвонками; в этом месте возможно безопасное пункционирование, так как спинной мозг отсутствует;
• Местная анестезия выполняется с помощью новокаина, лидокаина или прокаина до полного обезболивания мягких тканей;
• Игла вводится в запланированное место прокола срезом вверх под углом 90 градусов к поверхности кожи; затем осторожно, слегка наклоняя ее в сторону головы пациента, продвигается внутрь. Врач ощущает три провала иглы — через кожу, межпозвоночную связку и твердую оболочку спинного мозга;
• При третьем провале игла оказывается в подпаутинном пространстве, мандрен извлекается. В это время может выделиться ликвор; если он не поступил, игла необходимо вводить глубже очень осторожно, учитывая близость сосудистого сплетения и риск кровотечения;
• Находясь в канале спинного мозга игла используется для измерения ликворного давления с применением специального манометра или визуально, по интенсивности потока спинномозговой жидкости (норма — до 60 капель в минуту);
• Затем производится забор спинномозгового пункта в две пробирки: в стерильную помещается 2 мл жидкости для бактериологического анализа, во вторую — ликвор для анализа клеточного состава, уровня белка, сахара и проч.;
• После получения ликвора игла извлекается, место прокола закрывают стерильной салфеткой и фиксируют пластырем.

Указанный алгоритм действий обязателен вне зависимости от показаний и возраста больного. От аккуратности действий врача зависит риск опаснейших осложнений, а в случае спинномозговой анестезии — степень и длительность обезболивания.

Объем жидкости, полученный при пункции, может достигать 120 мл, однако для диагностики достаточно 2-3 мл, необходимых для дальнейших цитологических и бактериологических анализов. Во время процедуры может возникнуть дискомфорт в месте пункции, поэтому особенно чувствительным пациентам стоит рассмотреть возможность обезболивания и применение успокаивающих средств.

В течение всей манипуляции важно соблюдать максимальную неподвижность, поэтому взрослых удерживает в нужной позе помощник врача, а ребенка — один из родителей, который также помогает малышу успокоиться. У детей анестезия обязательна и позволяет обеспечить спокойствие пациенту, а врачу дает возможность аккуратно и не спеша действовать.

Многие пациенты испытывают страх перед пункцией, будучи уверенными, что это довольно болезненно. Однако на самом деле сама процедура вполне переносима; боль ощущается только в момент проникновения иглы через кожу. По мере того как анестетик начинает действовать, дискомфорт уходит, появляется ощущение онемения или распирания, а потом и вовсе негативные ощущения исчезают.

Если в процессе пункции был задет нервный корешок, то неизбежна резкая боль, подобная той, которая сопровождает радикулит, однако эти случаи относят скорее к осложнениям, нежели к нормальным ощущениям при проколе. В случае спинномозговой пункции при повышенном количестве ликвора и внутричерепной гипертонии по мере удаления избытка жидкости пациент отметит облегчение, постепенное исчезновение чувства давления и боли в голове.

Люмбальная пункция – больно ли это?

Люмбальная пункция проводится после местного обезболивания с использованием лидокаина. Почти все испытывают подобные ощущения на этапе введения анестетика, напоминающие онемение при стоматологическом лечении. Благодаря анестезии укол становится практически безболезненным. В случае повреждения спинномозгового нерва пациент может почувствовать резкую боль, похожую на электрический удар. Часты жалобы на головные боли.

Вот, как облегчить симптомы спинномозговой пункции:

1. Сразу после процедуры пациенту предписывается строгий постельный режим как минимум на 18 часов. При необходимости это время может быть увеличено до 3 дней.
2. При возникновении болей (головных или в области прокола) назначается обезболивающая терапия с использованием НПВП.
3. Также рекомендуется пациенту употреблять много теплой жидкости. При необходимости вводят плазмозаменители.

Процесс проведения анализа

В большинстве случаев для извлечения образца ликвора используется поясничная (люмбальная) пункция. Однако в некоторых ситуациях могут потребоваться желудочковая (вентрикулярная) или субокципитальная (затылочная) пункции, хотя это происходит довольно редко. Способы забора жидкости определяют стоимость процедуры, которая может изменяться в зависимости от места ее проведения и сложности анализа.

Процедура, длительность которой составляет в среднем 40-50 минут, проходит следующим образом:

1. Пациент располагается на спине, сгибая ноги в коленях и поджимая их к животу, а голову наклоняет к груди (в случае люмбальной пункции). При использовании иных методов забор производится в положении сидя или лежа.
2. Область прокола обрабатывается антисептическим раствором на основе йода и спирта.
3. Для обезболивания вводится новокаин в зону прокола.
4. Иглу вводят между третьим и четвертым или же пятым и шестым позвонками (при поясничной пункции), между височной, теменной и лобной костями (при желудочковой пункции), и между вторым шейным позвонком и затылочной костью (при затылочной пункции).
5. Производится забор ликвора. По скорости его выхода можно судить о наличии патологий: нормальным считается медленный поток каплями, а при повышении внутричерепного давления он вытекает стремительно. Для измерения давления применяется манометр.
6. Игла удаляется, а место прокола закрывается стерильной салфеткой.
7. Пациенту рекомендуется соблюдать постельный режим в течение суток.

Полученный ликвор нужно незамедлительно доставить в лабораторию.

Расшифровка результатов

Анализ ликвора начинается с оценки его внешнего вида. В норме жидкость прозрачная и бесцветная. Изменение цвета может указывать на наличие различных патологий:

1. Красный или оранжевый цвет свидетельствует о наличии крови, что может произойти при травмах, гематомах и опухолях.
2. Желтоватый оттенок указывает на продукты распада крови и билирубин, и может наблюдаться при застойных явлениях, опухолях, менингитах или после приема определённых медикаментов.
3. Зеленая окраска ликвора говорит о наличии гнойных процессов, таких как гнойный менингит, злокачественные опухоли или кисты.
4. Коричневый или темно-красный цвет может указывать на разрыв кисты или наличие крови, скопившейся в результате травмы (гематомы, геморрагии).

Увеличение количества клеток, выявленное при микроскопическом исследовании, именуют плеоцитозом. Незначительное отклонение возможно при эпилепсии, энцефалите, травмах, менингите, рассеянном склерозе (3-500 х 10 6 /л). Большое повышение – при абсцессе (1000-2000 х 10 6 /л), гнойном менингите в острой форме (2000-5000 х 10 6 /л). У новорожденных в ликворе присутствуют и другие клетки, что является нормой.

Повышение концентрации белка в ликворе (увеличенный альбуминовый индекс), обнаруженное при биохимическом исследовании, говорит о менингите, новообразованиях, повреждениях мозга, кровоизлиянии, полиомиелите. Пониженный результат может показывать наличие инфекций, водянку мозга. Норма составляет 0,12-0,34 г/л.

Содержимое сахара ниже 2,78 ммоль/л может наблюдаться при менингите (бактериальном или грибковом), опухолях, а также при паразитарных инфекциях (цикстицеркоз, эхинококкоз). Показатели выше 3,89 ммоль/л могут быть при менингоэнцефалите, травмах головного мозга, инсультах (как ишемическом, так и геморрагическом), воспалениях и злокачественных заболеваниях. У новорожденных существует более широкий диапазон значений – от 1,94 до 4,16 ммоль/л.

Снижение относительной плотности (при норме в 1,005-1,009) ликвора говорит о водянке головного мозга, увеличение – о почечной недостаточности, сахарном диабете, ушибах.

Изменения показателя pH могут указывать на патологические процессы. Нормой считается значение 7,3-7,4. При метаболическом алкалозе или субарахноидальном кровоизлиянии среда становится более кислой.

Для дифференциации заболеваний производится сравнение значений лактата и пирувата, а также их соотношения с нормальными показателями.

Таблица. Нормальные значения лактата и пирувата.